China
English
Brands 品牌
Cooperation 合作发展
QQ客服1
QQ客服2
QQ客服3
QQ客服4
技术文章

人一氧化氮(NO)ELISA试剂盒说明书
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人一氧化氮(NO)水平。用纯化的一氧化氮(NO) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入一氧化氮(NO)，再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的一氧化氮(NO)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人一氧化氮(NO)浓度。

使用目的：
本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中一氧化氮(NO)含量。

检测范围：10μmol/L -200μmol/L
规格：96人份/盒


试剂盒组成

1.30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶   2.酶标包被板 12孔×8条   3.酶标试剂 6ml×1瓶   4.样品稀释液 6ml×1瓶    5.显色剂A液 6ml×1瓶
6.显色剂B液6ml×1/瓶   7.标准品（16ng/L） 0.5ml×1瓶 8.标准品稀释液 1.5ml×1瓶 9.终止液 6ml×1瓶 10.封板膜 2张
11.说明书 1份 12.密封袋 1个

操作步骤
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为150μmol/L，100μmol/L ，50μmol/L，25μmol/L，12.5μmol/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：同3。
8. 洗涤：同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
11.本试剂盒只适用于研究。

保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月

产品详细信息：www.baigle360.com/shopstyle/productinfo/11122697.html
上一篇：暂无
下一篇：人白介素6酶联免疫试剂盒说明书
Home | Contract us | Feedback | Career | Brands | Guide | Sitemap | FAQs
佰购试剂网  上海创赛科学仪器有限公司
电话：021-50327598 021-50329410   传真：021-20227816  地址：上海市浦东新区金港路333号禹洲金桥大厦520室   邮编：201206
   网站管理入口
网络推广：化工展览网   技术支持：